Swe Rekombinantinis tripsino-EDTA tirpalas be fenolio raudonojo

Tripsinas yra serino hidrolazė, kuri gali nupjauti lizino ir arginino karboksilo galą polipeptidinėse grandinėse. Tripsino virškinimas naudojamas audinių ląstelių ekstrakcijai, kultūrai ir ląstelių kultūrai in vitro, siekiant hidrolizuoti tarpląstelinius baltymus ir atskirti audinius ar ląsteles į atskiras ląsteles. Įprastas tripsinas gaunamas iš gyvūnų, tokių kaip kiaulės ir karvės, kasos. Įprastų kasos fermentų kilmė ir gamybos proceso ypatybės reiškia, kad juose neišvengiamai yra gyvūninės kilmės priemaišų ir galimo virusinio užteršimo. Šiame produkte naudojamas rekombinantinis kiaulių tripsinas, pakeičiantis įprastą tripsiną. Gamybos procese nenaudojamos jokios gyvūninės kilmės žaliavos, o rekombinantinio kiaulių tripsino grynumas ir gyvybingumas užtikrinamas atliekant kelis gryninimo etapus. Tai leidžia ne tik pakeisti įprasto tripsino funkciją, bet ir būti naudojamas specialioms ląstelėms ar audiniams virškinti, kur griežtai reikalaujama be gyvūninės kilmės. Be to, gaminyje yra EDTA, nėra fenolio raudonumo indikatorių.

Laivas su šlapiu ledu; Laikyti 4 laipsnių temperatūroje nuo šviesos 12 mėnesių. Jei produktas nenaudojamas trumpą laiką, rekomenduojama ilgiau laikyti -20 laipsnių temperatūroje.

Pastaba: šie protokolai daugiausia naudojami prilipusioms ląstelėms. Kad audinys būtų virškinamas, pirmiausia audinį reikia supjaustyti atitinkamo dydžio. Virškinimui reikalingas laikas labai skiriasi priklausomai nuo audinio, todėl paprastai patartina, kad audiniai būtų pakankamai suskaidyti po virškinimo.

1. Pašalinkite pradinę ląstelių auginimo terpę ir nuplaukite ląsteles 1-2 kartus PBS, terpe be serumo arba kitais buferiais, kad pašalintumėte serumo likučius.

2. Įpilkite reikiamą kiekį rekombinantinio tripsino skaidymo tirpalo, kad padengtumėte ląsteles, ir virškinkite po mikroskopu, kad stebėtumėte, daugumos ląstelių virškinimo laikas yra tarp 30 s -3 min.; nevirškinamoms ląstelėms, galima įdėti į ląstelių kultūros inkubatorių, kad būtų virškinama tam tikrą laiką (virškinimo laikas yra tik orientacinis, konkretus virškinimo laikas turėtų būti nustatytas pagal faktinę situaciją).

3. Kai ląstelėse pastebimas reikšmingas susitraukimas arba morfologiniai pokyčiai, atkurtą tripsino virškinamąjį tirpalą išsiurbkite ir įpilkite atitinkamą kiekį serumo turinčios ląstelių auginimo terpės, kad užbaigtumėte virškinimą (jei ląsteles sunku išstumti iš plokštelės dugno, kai švelniai pučiama pipete, tai rodo, kad virškinimo laikas yra nepakankamas ir virškinimą galima atnaujinti pridedant tripsino ląstelių virškinimo. per didelis virškinimas).

4. Surinkite ląstelių suspensiją į centrifugos mėgintuvėlį, centrifuguokite 800-1200 aps./min. greičiu 3-5 min., įpilkite atitinkamą kiekį serumo turinčios ląstelių auginimo terpės (nebūtina).

5. Švelniai išpūskite ląsteles, kad susidarytumėte ląstelių suspensiją, kurią būtų galima naudoti pernešimui arba tolesniems eksperimentams.

1. Šis produktas gali būti tiesiogiai naudojamas ląstelėms virškinti 4 laipsnių temperatūroje. Virimo temperatūrą galima pasirinkti kambario temperatūroje arba inkubatoriuje, bet nešildykite produkto tiesiogiai iki 37 laipsnių. Pakartotinis temperatūros kilimas ir kritimas turi tam tikrą poveikį fermentų aktyvumui.

2. Gavus prekę galima laikyti porcijomis pagal poreikį; jei reikia laikyti -20 laipsnių temperatūroje, venkite pakartotinio užšaldymo ir atšildymo.

3. Virškinimo laikas skiriasi priklausomai nuo ląstelių linijų ar audinių, todėl patikrinkite optimalų virškinimo laiką, kad išvengtumėte pernelyg ilgo virškinimo, kuris gali turėti įtakos ląstelių veiklai ir būklei.

4. Šis produktas yra aseptinis ir paruoštas naudoti, buvo patikrintas dėl mikoplazmos ir endotoksinų. Naudodami atkreipkite dėmesį į aseptikos reikalavimus.

5. Savo sveikatos ir saugumo sumetimais dirbdami dėvėkite laboratorinį chalatą ir mūvėkite pirštines.

Tik tyrimams!

Populiarus Žymos: swe rekombinantinis tripsino-edta tirpalas be fenolio raudonojo, Kinijos swe rekombinantinis tripsino-edta tirpalas be fenolio raudonojo gamintojai, tiekėjai, gamykla