Hoechst 33258 dažymo tirpalas (paruoštas naudoti)

Hoechst 33258 molekulinė formulė yra C25H24N6O·3HCl, molekulinė masė yra 533,88, o CAS numeris yra 23491-45-4. Hoechst 33258 yra mėlynas fluorescencinis dažiklis, galintis prasiskverbti pro ląstelės membraną, o jo fluorescencija žymiai sustiprėja derinant su dvigrande DNR. Didžiausias sužadinimo bangos ilgis yra 346 nm, o didžiausias emisijos bangos ilgis yra 460 nm. Hoechst 33258 dažniausiai naudojamas apoptozei aptikti, branduoliniam dažymui arba įprastiniam DNR dažymui. Jis gali būti naudojamas fiksuotų ląstelių ir audinių arba nefiksuotų ląstelių ir audinių branduoliams dažyti. Po dažymo jį galima stebėti fluorescenciniu mikroskopu arba aptikti srauto citometrija. Stebint fluorescenciniu mikroskopu, jis sužadinamas ultravioletine šviesa, kuri yra mėlyna fluorescencija.

Šis produktas yra paruoštas naudoti tirpalas, kurio koncentracija yra optimizuota, kad atitiktų visų rūšių įprastinio dažymo poreikius.

Šlapio ledo transportavimas; Laikyti 2-8 laipsnių temperatūroje nuo šviesos, galioja 6 mėnesius.

1. Fiksuotoms ląstelių arba audinių sekcijoms:

a. Fiksuotų ląstelių arba audinių mėginiams po fiksavimo pašalinkite fiksavimo tirpalą ir nuplaukite PBS arba kitu tinkamu buferiu 2-3 kartus, 3-5 min. kiekvieną kartą (jei norite aptikti suspenduotas ląsteles, laikykitės įprastų nurodymų visuose eksperimentuose turi būti įtrauktas suspenduotų ląstelių veikimo metodas, centrifugavimas ir kiti etapai);

b. (Neprivalomas veiksmas) Jei fiksuotas ląsteles ar audinius reikia apdoroti imunofluorescenciniu dažymu, pirmiausia reikia atlikti atitinkamą gydymą, o po to – dažyti Hoechst 33258;

c. Tiesiogiai paimkite atitinkamą kiekį produkto Hoechst 33258 dažų tirpalo (parengto naudoti tipo), kad padengtumėte mėginį, ir inkubuokite kambario temperatūroje apie 5 minutes tamsoje;

d. Pašalinkite dažų tirpalą ir nuplaukite PBS ar kitu tinkamu buferiu 2-3 kartų, 3-5 min. kiekvieną kartą;

e. Užsandarinus plokšteles arba tiesiogiai padėjus po fluorescenciniu mikroskopu, sužadinimo bangos ilgis buvo 350 nm, o emisijos bangos ilgis – 460 nm.

2. Gyvoms ląstelėms arba kultivuotiems audiniams:

a. Į ląstelių kultūrą įpilkite atitinkamą kiekį Hoechst 33258 dažų tirpalo (paruošto naudoti tipo), kad jis visiškai padengtų dažytiną mėginį; paprastai į 6-šulinėlių plokštelės šulinėlį reikia įpilti 1 ml dažymo tirpalo, o į 96-šulinėlio plokštelės šulinėlį – 100 μL dažančio tirpalo. Mėginiai buvo inkubuojami 10-20 min. inkubatoriuje 37 laipsnių temperatūroje.

b. Pašalinkite dažų tirpalą ir nuplaukite PBS ar kitu tinkamu buferiu 2-3 kartų, 3-5 min. kiekvieną kartą;

c. Tiesiogiai stebint fluorescenciniu mikroskopu, sužadinimo bangos ilgis buvo 350 nm, o emisijos bangos ilgis - 460 nm.

Pastaba:

1. Visi fluorescenciniai dažai turi fluorescencijos gesinimo problemą. Po dažymo rekomenduojama fotografuoti kuo greičiau. Norint sulėtinti fluorescencijos gesinimą, galima naudoti antifluorescencinį gesinimo sandariklį (rekomenduojama G1401).

2. Dirbdami dėvėkite laboratorinį chalatą ir vienkartines pirštines.

Tik tyrimams!

Populiarus Žymos: hoechst 33258 dažymo tirpalas (paruoštas naudoti), Kinijos hoechst 33258 dažymo tirpalas (paruoštas naudoti) gamintojai, tiekėjai, gamykla